Zašto se drobljenje radi u testu peroksidacije lipida TCA?
Za olakšavanje homogenizacije:drobljenje uzorka tkiva pomaže u razgradnji staničnih struktura i otpuštanju lipida u okolni medij. Ovaj proces homogenizacije osigurava da su lipidi ravnomjerno raspoređeni i dostupni za reakciju s tiobarbiturnom kiselinom (TBA).
Za poboljšanje ekstrakcije lipida:drobljenjem uzorka tkiva povećava se površina lipida, što omogućuje bolju ekstrakciju u organsko otapalo (obično mješavina kloroforma i metanola) koje se koristi u TBARS testu. Ovaj je korak ključan za izolaciju lipida od ostalih staničnih komponenti i olakšavanje njihove reakcije s TBA.
Za oslobađanje proizvoda peroksidacije lipida:drobljenje uzorka tkiva može pomoći u oslobađanju proizvoda peroksidacije lipida, poput malondialdehida (MDA), koji su često vezani za stanične proteine ili druge makromolekule. Ometanjem ovih veza, drobljenje omogućuje oslobađanje i naknadnu kvantifikaciju MDA i drugih TBARS.
Usitnjavanjem uzorka tkiva optimizira se homogenizacija, ekstrakcija lipida i oslobađanje produkata lipidne peroksidacije, što dovodi do točnijih i pouzdanijih mjerenja lipidne peroksidacije u TBARS testu.
