Kako Mjera katalaze koncentracijama

katalaze jebiološko ( organsko ) katalizator . Ovaj enzim je jedan od najjačih poznatih katalizatora i ima pozitivne učinke na ljudsko tijelo , a ključno je za život . Katalaza djeluje kao katalizator u ubrzava raspadanje vodik peroksida . Vodik peroksid jemetabolički nusprodukt koji je otrovan za stanice , ako ne i ukloniti . Katalaze pomaže u razbije vodikov peroksid u vodu i kisik . Katalaza i pomagala na oksidaciju druge toksine kao što fenola , mravlja kiselina, formaldehida i alkohola . To je ono što vam je potrebno
dva 110 ml kromogen u fosfatnom puferu
300 ul supstrat - 30 % vodikov peroksid
400 μL.HRP - hren peroksidaza u fosfatnom puferu Screenshot, 60 ml fosfata tampon Srpski 250 ml uzorka rezrjedni tenzid u fosfatnom puferu Screenshot, dva 30 ml supstrata razrjeđivača fosfatnog pufera Screenshot Dvije 30 ml reagensa za zaustavljanje - Natrijev azid Screenshot, dvije bočice 160 u /bočici standardne katalaze Screenshot spektrofotometar
10 ul podesive pipete
1 cm stazom duljine Spektrofotometrijske kivete
1,5 ml polipropilenske mikrocjevčica s kapom
epruvete - 12x75 milimetra ( 2,5 ml svaki )
Timer
deionizirana vode
Screenshot pokazati više Uputstvo Screenshot
1

Pripremite zalihe katalaze da će se mjerenje dodavanjem 200 mikrolitara ( uf) deionizirane vode do koncentracije katalaze u 50 mililitru (ml) epruvete . Razina koncentracije catalese treba biti 160 jedinica po mililitri ( U /ml ) .
2

Dodaj 30 uL razrijeđenog katalaze u cijevi . Dodati 500 ul supstrata ( vodikov peroksid - 10mm H2O2 ) u svaku cijev . Budite oprezni da ne prskati vodikov peroksid, kada se radi s njom .
3

Inkubira svaku pojedinačnu cijev za jednu minutu na sobnoj temperaturi .
4

Dodaj 500 &Mu , L reagensa u svaku bočicu . Kapa svaku bočicu i miješaju okretanjem bočicu gore i dolje . Ne vrtlog smjesu , protresite bočicu ili promiješajte ga s objektom .
5

Dodaj 20p.L svake reakcijske smjese u epruvetama . Dodavanje 2 mililitara HRP reagensa u svaku epruvetu . Opet , miješati otopinu okretanjem epruvete se nekoliko puta .
6

ponovno Inkubirajte otopine , ovog puta tijekom 10 minuta pri sobnoj temperaturi .
7

Read apsorbancije razina otopine spektrofotometrom . Mjere Spektrofotometar svjetlo valne duljine kako bi se utvrdilo točno što su prisutni i što i koncentracije tvari . Ova metoda će dati točno očitanje koncentracija katalaze . Informacije se koristi u kontekstu interakcije katalaze s vodikovim peroksidom , kao što je u ovom eksperimentu , kao i prirodno odvija u ljudskom tijelu .