Kako količina probave BAPNA varira s vremenom?
Razgradnja BAPNA (benzoil-DL-arginin-p-nitroanilida) pomoću tripsina slijedi tipičnu kinetiku enzima Michaelis-Menten. Brzina probave se u početku povećava s vremenom kako se više enzimskih molekula uključuje u reakciju. Međutim, kako se koncentracija supstrata s vremenom smanjuje, brzina probave se usporava. Odnos između količine probavljene BAPNA i vremena može se opisati sljedećom jednadžbom:
[BAPNA]t =[BAPNA]0 - k[E][BAPNA]0*t
Gdje:
- [BAPNA]t:Količina BAPNA probavljena u vremenu t
- [BAPNA]0:Početna koncentracija BAPNA
- k:Konstanta brzine reakcije
- [E]:Koncentracija tripsina
- t:Vrijeme
Grafik [BAPNA]t u odnosu na t obično prikazuje hiperboličku krivulju. Početna linearna faza krivulje predstavlja razdoblje kada je brzina reakcije konstantna i proporcionalna koncentraciji enzima. Kako reakcija napreduje, krivulja se spušta zbog iscrpljivanja supstrata i sve niže stope digestije.
Mjerenjem početne brzine (Vo) reakcije i određivanjem Michaelis-Mentenove konstante (Km) putem grafičke analize (npr. Lineweaver-Burk ili Hanes-Woolf dijagrami), moguće je karakterizirati kinetiku enzima i steći uvid u katalitičku učinkovitost i afinitet supstrata tripsina za BAPNA.
