Što je eksperiment za probavu škroba?
Cilj:
Cilj ovog eksperimenta je promatranje i proučavanje procesa probave škroba pomoću enzima i praćenje promjena u prisutnosti škroba tijekom vremena.
Materijali:
- 2 epruvete
- Vodena kupelj ili grijaći blok postavljen na 37°C (tjelesna temperatura)
- Otopina joda (razrijeđena)
- Benedictovo rješenje
- Otopina škroba (1%)
- Enzim amilaza iz sline (u tekućem obliku)
- pH indikatorske trake
- Štoperica ili mjerač vremena
- Kapaljka
- Zaštitne naočale
Postupak:
1. Priprema epruvete:
- Označite jednu epruvetu kao "Kontrola", a drugu kao "Enzim".
2. Postavljanje kontrole:
- U epruvetu "Kontrola" dodati 5 ml otopine škroba.
- Zatim u epruvetu "Kontrola" dodati 5 ml vode.
- Sadržaj epruvete "Control" lagano promiješajte.
3. Postavljanje enzima:
- U epruvetu "Enzim" dodati 5 ml otopine škroba.
- U epruvetu "Enzim" dodati 5 ml enzima amilaze iz sline.
- Sadržaj epruvete "Enzima" lagano promiješajte.
4. Inkubacija:
- Stavite epruvete za ispitivanje "Kontrola" i "Enzim" u vodenu kupelj ili grijaći blok postavljen na 37°C.
- Provjerite jesu li epruvete uronjene u vodu kako bi se održala stalna temperatura.
5. Vremenski intervali:
- Ostavite epruvete u vodenoj kupelji određene vremenske intervale:0 minuta (početno stanje), 5 minuta, 10 minuta i 15 minuta.
6. Testiranje na škrob:
- U svakom vremenskom intervalu izvadite epruvete s "Enzimom" i "Kontrolom" iz vodene kupelji.
- U svaku epruvetu dodajte 2-3 kapi razrijeđene otopine joda.
- Promatrajte promjene boje u obje epruvete.
- Jod postaje plavo-crn u prisustvu škroba.
7. Testiranje glukoze:
- U svakom vremenskom intervalu izvadite epruvete s "Enzimom" i "Kontrolom" iz vodene kupelji.
- U svaku epruvetu dodajte 5 kapi Benedictove otopine.
- Stavite epruvete u kipuću vodenu kupelj 2-3 minute.
- Promatrajte promjene boje u obje epruvete.
- Benedictova otopina postaje zelena, žuta, narančasta ili crvena u prisutnosti rastućih koncentracija glukoze.
8. Praćenje pH:
- U svakom vremenskom intervalu izvadite epruvete s "Enzimom" i "Kontrolom" iz vodene kupelji.
- Koristite pH indikatorsku traku za mjerenje pH otopina u svakoj epruveti.
9. Napomene:
- Zabilježite opažanja i promjene boje u obje epruvete u svakom vremenskom intervalu.
10. Ponovite eksperiment:
- Ponovite eksperiment kako biste dobili više podatkovnih točaka i osigurali dosljednost rezultata.
Očekivani rezultati:
- U epruveti "Kontrola" otopina joda će tijekom cijelog pokusa ostati plavo-crna, što ukazuje na prisutnost škroba. Benediktova otopina će ostati plava u epruveti "Kontrola", što ukazuje na odsutnost glukoze. pH u "Kontrolnoj" epruveti trebao bi ostati relativno stabilan.
- U epruveti "Enzima" otopina joda će s vremenom postupno gubiti plavo-crnu boju, što ukazuje na razgradnju škroba enzimom amilazom iz sline. Kako vrijeme prolazi, otopina će postati bistrija ili će promijeniti boju u svjetliju. Benedictova otopina promijenit će boju u zelenu, žutu, narančastu ili crvenu, što ukazuje na prisutnost glukoze proizvedene probavom škroba. pH u epruveti "Enzima" može malo pasti zbog stvaranja kiselina tijekom probave.
Zaključak:
Pokus demonstrira proces probave škroba pomoću enzima salivarne amilaze. Promatrajući promjene boje u prisutnosti joda i Benedictove otopine, možemo pratiti razgradnju škroba u glukozu. Praćenje promjena pH daje dodatne uvide u kemijske promjene koje se događaju tijekom probave. Ovaj eksperiment naglašava temeljne principe interakcija enzima i supstrata i ulogu enzima u razgradnji složenih ugljikohidrata u jednostavnije šećere.