Genetski Protokoli
genomske DNA pruža nacrt za stanice da se organiziraju u živim organizmima . DNK sadrži četiri ponavljaju dušične baze nazvane adenin, gvanin , citozin i timin . Istraživači su uspješno odrediti cijelu bazu slijed , genom , za mnoge složenih organizama uključujući i ljude . Postoji mnogo važnih razloga za slijed genoma . Medicinske genetike bavi otkrićem genetskih abnormalnosti uzrokuju bolesti poput dijabetesa , Alzheimerove bolesti i raka . Evolucijski genetičari usporedbu genoma iz srodnih vrsta razvijati točne taksonomiju . Osnovni genetski protokola u istraživanju suisti bez obzira nacilj istraživanja . Izoliranje DNK iz stanica
Genetička istraživanja zahtijeva vađenje čistog DNK uzorka iz stanica . Osnovni protokol počinje prekidanjem i uklanjanje zaštitna biljka stanične stijenke ili životinja stanične membrane s enzim lizozoma . Negenetskim staničnih komponenti u obliku taloga se odstrani brzom predenje centrifugom , a DNA ostaje u otopini . DNA se zatim istaloži u prisutnosti natrij acetata soli s etanolom . Završne ccntrifugirajući talozi i pelete čista genetski materijal za istraživačke svrhe .
Polimeraze lančana reakcija
Genetička istraživanja zahtijeva dovoljno primjeraka navedenih DNA regija . Polymerase chain reaction , PCR ili jepostupak za proizvodnju eksponencijalno kopije DNA . Protokol zahtijeva pročišćeni DNK , Taq polimeraze baze nazivom deoksinukleotide i male lance DNA premijerki na određenom području . Reakcijska smjesa se stavi u termocikleru , instrument mogućnost brzog promjena temperature . Zagrijavanje smjese na 95 stupnjeva Celzijusa odvaja dvolančana DNA , tada se ohladi na 48 stupnjeva, tako da klice mogu sjediti ili žarenje , podudaranje bazama . Temperatura je porasla za 72 stupnjeva kada Taq polimeraze okuplja deoksinukleotide , nazvao proširenje , u novi primjerak DNA .
Genetski DNA sekvencioniranje
Nizanje podataka pojavljuje kao boji bendovi koje označavaju DNK baze .
automatiziranim sekvenciranjem se koristi kako bi se utvrdilo osnovnu točan slijed i usporediti s normalnim abnormalnim DNA . Protokol dodaje fluorescentno obilježeni dideoxynucleotides ili ddNTPs , normalnim PCR reakcije, koje slučajno zaustavlja proširenje DNA fragmenata . Proizvodi su različiti fragmenti DNA jednim bazom . Svaka vrsta baza ima drugačiju boju . Konačni proizvod koji se učitava na automatizirani sekvencer , instrument dizajniran za odvajanje fragmenata po veličini na polimera pomoću električne struje . Kada su fragmenti do polimera završna točka ,digitalna kamera bilježi osnovnu boju i šalje podatke na računalu za analizu .
Genotipiziranje i DNK
DNK služi za identifikaciju čovjeka ostaje .
Genotipiziranje jemetoda koja uspoređuje male segmente genom iz jednog organizma u drugi . Cilj je da se otkriti male razlike u veličini PCR fragmenta koji proizlazi iz normalnih ili slučajnih promjena baze u DNA . Protokol dizajn počinje s osnovnim PCR pomoću jednog fluorescentno -obilježenim premaz za detekciju na automatiziranim sekvencera . Označeni proizvodi su razdvojeni po veličini i snimila digitalnim fotoaparatom na računalo radi analize . Genotipizacija protokoli su dizajnirani za forenzičku identifikacije , DNK i očinstva ili identifikaciju genetske abnormalnosti koje rezultiraju bolešću .
