Razlika između izravan i neizravan ELISA

enzim - vezanog imunosorbenta (ELISA ) uključuje reakciju kompleksa protutijelo - enzim s antigenom i antitijela nepokretan održava na čvrstu površinu . Inkubacije na konjugirane enzima s prikladnim supstratom ,proizvod se oblikuje . Formiranje proizvoda pomaže otkriti prisutnost antigena i antitijela , a njegova količina daje mjeru količine antigen - antitijelo , koja se dogodila reakcija . ELISA test može se provesti u dva oblika: izravne i neizravne . Test format

U izravnom ELISA testa ,primarno antitijelo se održava na zidovima mikrotiteru . Kad je uzorak se sumnja da sadrži antigen je dodan , jeantigen - antitijelo reakcija . Dalje,enzim - vezana sekundarnim antitijelom koji je sposoban reagirati s antigenom se doda . Ako je antigen prisutan u uzorku , da se veže na ovaj enzim - vezana antitijela . Kadabezbojni supstrat je dodan , akoboja razvija , što ukazuje na prisutnost antigena . U neizravnom ELISA , antigen se održava na zidovima mikrotitera . Kad uzorak se sumnja da sadrži antitijela se doda ,antigen - antitijelo reakcija odvija . Dalje,enzim - vezana sekundarna antitijela sposobna za reakciju s nevezanog regije antitijela se doda . Kadbezbojan Podloga je dodao , to dovodi do razvoja boji akouzorak korišten sadrži antitijela .
Jednostavnost Ispitivanje

širok raspon označen sekundarni antitijela su komercijalno dostupni . Osim toga , moguće je stvaranje više primarnih antitijela na dane vrste i korištenje isti sekundarnog antitijela za detekciju . To činineizravna ELISA lako izvesti . U izravnom ELISA , primarni protutijela mora biti posebno pripremljena reagirati sa specifičnim antigenom sumnja da bude prisutan u uzorku . To činiizravna ELISA nepovoljnija u odnosu na neizravne testu .
Ubrzano ispitivanje

izravna ELISA test je brz u odnosu na neizravne testu , jer je koristi samo jedno antitijelo . Neizravna ELISA zahtijeva dodatni korak inkubacije s drugom antitijela tijekom postupka ispitivanja , što uzrokuje kašnjenje u dobivanje rezultata .
Osjetljivost

izravna ELISA test je manje osjetljiva od neizravnih obliku testa , jer ima puno manje pojačanje signala . Osim toga ,označavanje primarnog antitijela s enzimom može utjecati na njegovu immonoreactivity profil . U slučaju neizravnog ELISA ,primarno antitijelo nije označen i zbog toga , on zadržava svoju imunoreaktivnost . Osim toga , svaki primarni antitijela ima mnogo epitope koje se vežu sa sekundarnim antitijelima , a to omogućuje pojačanje signala , poboljšavajući osjetljivost metoda je . Međutim , postojivjerojatnost cross reaktivnosti između antigena i sekundarnog antitijela , što dovodi do pogreške u rezultatima . Ne postoji takva mogućnost u izravnom ELISA metodom .