Protokol za transfekcija GFP

upotreba zeleni fluorescentni protein revoluciju molekularne i stanične biologije , to dozvoljeno znanstvenici vizualizirati stanica i proteina na način nikad prije moguće . Njegov utjecaj na znanstvena istraživanja bio je toliko duboka da je u 2008 Osamu Shimomura je osvojio Nobelovu nagradu za kemiju za otkriće i izolaciju GFP iz meduza fluorescentne . Definicije

gensekvencija deoksiribonukleinske kiseline u stanicama , koji je odgovoran za proizvodnju određenog proteina . Plazmid jezasebna komad DNK koji sadrži gen od interesa kao što GFP . Transfection jemetoda za uvođenje plazmida u stanice .
Metode

Transfection obično uključuje miješanje DNA plazmida koji sadrži gen poput GFP lipidima i soli . Stanice su izložene ovoj otopini , koja stvara rupe za stanične membrane , čime se plazmid u stanici u kojoj je gen može biti izražena kao protein . Komercijalni transfekcije setove su dostupni , ili reagensi mogu biti izrađene u laboratoriju . Izbor metode transfekcije ovisi o tipu stanica i plazmidi koji se upotrebljavaju . GFP je vizualizirati i pratiti s opremom koja prepoznaje fluorescenciju .
Koristi Srpski Srpski

GFP je obično vezan za proteine ​​od interesa za transfekcije . Nobelova odbora izdvojio praćenje " oštećenja živčanih stanica tijekom Alzheimerove bolesti " i " kako proizvode inzulin beta stanice su stvorili u gušterači rastućeg embrija ", kao primjera .