Koju tvar koristite za uzgoj virusa u laboratoriju?
Virusi su obvezni intracelularni paraziti, što znači da se mogu razmnožavati samo unutar stanica organizma domaćina. U laboratorijskim uvjetima, virusi se obično uzgajaju u kulturama stanica, koje se pripremaju iz živih stanica koje su izolirane iz organizma. Specifična vrsta stanične kulture koja se koristi ovisi o virusu koji se proučava. Na primjer, neki virusi mogu rasti samo u određenim vrstama stanica, kao što su ljudske ili životinjske stanice.
Proces uzgoja virusa u staničnim kulturama uključuje nekoliko koraka:
1. Dobijanje virusa: Prvi korak je nabaviti virus koji želite proučavati. To se može učiniti izolacijom virusa iz zaraženog organizma, kao što je ljudski pacijent ili životinja. Alternativno, virus se može dobiti iz laboratorijskih zaliha.
2. Priprema stanične kulture: Sljedeći korak je priprema stanične kulture. To uključuje dobivanje odgovarajuće vrste stanica i njihov uzgoj u mediju kulture koji stanicama osigurava hranjive tvari potrebne za preživljavanje. Medij kulture obično je nadopunjen serumom koji sadrži faktore rasta koji pomažu rast stanica.
3. Infekcija stanica: Nakon što je stanična kultura pripremljena, virus se unosi u kulturu. To se može učiniti izravnim dodavanjem virusa u medij kulture ili korištenjem tehnike koja se zove transfekcija. Transfekcija uključuje unošenje virusa u stanice pomoću kemijskog sredstva ili fizičke metode.
4. Inkubacija: Nakon što su stanice zaražene virusom, kultura se inkubira na odgovarajućoj temperaturi i vlažnosti. To omogućuje virusu repliciranje unutar stanica. Razdoblje inkubacije može varirati ovisno o virusu koji se proučava.
5. Sakupljanje virusa: Nakon što se virus umnoži do dovoljne razine, virus se sakuplja iz stanične kulture. To se može učiniti prikupljanjem medija kulture i centrifugiranjem kako bi se uklonile stanice. Supernatant, koji sadrži virus, zatim se skuplja i pohranjuje.
Virus koji je sakupljen iz stanične kulture može se zatim koristiti za daljnja istraživanja, poput karakterizacije, pročišćavanja ili razvoja cjepiva.
