Kada brojite eritrocite i leukocite, koristite li hemocitometar za koncentrirani uzorak krvi?
Pri brojanju crvenih krvnih stanica (RBC) i bijelih krvnih stanica (WBC), u hemocitometru se koristi razrijeđeni uzorak krvi, a ne koncentrirani uzorak. Koncentriranje uzorka krvi dovelo bi do netočnog brojanja stanica. Evo postupka brojanja eritrocita i leukocita pomoću hemocitometra:
Broj crvenih krvnih stanica (RBC)
1. Priprema razrijeđenog uzorka krvi:
- Razrijedite uzorak krvi u specifičnoj tekućini za razrjeđivanje, obično s omjerom razrjeđenja od 1:200 za eritrocite.
- Temeljito promiješajte razrijeđenu krv.
2. Punjenje hemocitometra:
- Postavite pokrovno stakalce na hemocitometar, pazeći da su rubovi zapečaćeni kako bi se stvorila komora za brojanje.
- Unesite malu količinu razrijeđenog uzorka krvi u hemocitometar pomoću kapilarne cijevi ili mikropipete.
3. Brojanje crvenih krvnih stanica:
- Koristite mikroskop da vizualizirate stanice u komori za brojanje.
- Usredotočite se na mrežno područje hemocitometra, koje je podijeljeno na velike i manje kvadrate.
- Izbrojite broj crvenih krvnih zrnaca unutar navedenih kvadrata prema određenim pravilima brojanja (npr. brojanje stanica koje dodiruju gornju i lijevu crtu i isključuju one koje dodiruju donju i desnu crtu).
4. Izračun:
- Pomnožite izbrojani broj eritrocita s odgovarajućim faktorom razrjeđenja i dubinom komore kako biste dobili broj eritrocita po jedinici volumena (obično stanica/μL).
Broj bijelih krvnih stanica (WBC)
1. Priprema razrijeđenog uzorka krvi:
- Pripremite poseban uzorak razrijeđene krvi, obično s omjerom razrjeđenja od 1:20 za leukocite.
- Temeljito promiješajte razrijeđenu krv.
2. Punjenje hemocitometra:
- Ponovite isti postupak kao za broj crvenih krvnih zrnaca, stavljajući pokrovno stakalce na hemocitometar i uvodeći razrijeđeni uzorak krvi.
3. Brojanje bijelih krvnih stanica:
- Koristite mikroskop da vizualizirate stanice u komori za brojanje.
- Usredotočite se na mrežno područje hemocitometra i izbrojite broj leukocita unutar navedenih kvadrata.
- Razlikujte različite vrste bijelih krvnih zrnaca ako je potrebno (npr. neutrofili, limfociti, monociti itd.).
4. Izračun:
- Pomnožite izbrojani broj leukocita s odgovarajućim faktorom razrjeđenja i dubinom komore kako biste dobili broj leukocita po jedinici volumena (obično stanica/μL).
Ključno je slijediti posebne upute i smjernice proizvođača hemocitometra i laboratorijski protokol kako bi se osiguralo točno brojanje stanica.
