PMBC Protokol

Krioprezervirani mononuklearne stanice periferne krvi ( PBMC ) sučesti izvor uzoraka za istraživanja koja uključuje imunoterapija i reakcije na cjepiva . Dok su neki protokoli ograničena na izolaciji i zamrzavanje fazama procesa , drugi su postupci odmrzavanja. Zamrzavanje Postupak

komercijalni Spoj promovirati odvajanje Postupak izolacije i stavlja se u svaku od 50 ml epruvetu za centrifugiranje , a epruvete su centrifugirane trideset sekundi . Kape krvnih cijevi su poprskati alkohola prije otvaranja , a zatim antikoagulans liječenih cijeli krvi onda prenosi pipetom u epruvete za centrifugu . Sloj plazme u krvi se ukloni pomoću pipete .
Smrzava

Stanice iz prethodnog koraka se zatim centrifugiraju u puferiranoj fiziološkoj otopini u tri puta . Nakon brojanja stanica , uzorci se centrifugiraju zatim suspendira u zamrznutom stanju u mediju . Primjerci u zamrzavanje medij naprijed su podijeljeni između kriobočice u jednoj ml količinama . Bočice su pohranjeni tijekom noći u

-70 ° C zamrzivačem i preselio se dugotrajno skladištenje u tekućem dušikusljedeći dan .
Siguran otapanja

kriobočice prenose iz tekućeg dušika na 37 ° C i vodenoj kupelji uzorak je ostavljena da se otopiti jednu do dvije minute . Topla transporta medija je dodan u svaku bočicu . Suspenzija stanica razrijedi se centrifugira na sedam minuta . Broj i vijabilnost stanica se provjeravaju , ako stanice trebaju usredotočiti, uzorci se centrifugira još sedam minuta . Uzorak je razrijeđen u radno rješenje i odmorni za dvanaest do osamnaest sati prije početka ispita u određenom protokolu .