Zašto stavljate rendgenski film na vrh najlonske membrane u ladici?

U kontekstu tehnika molekularne biologije kao što je Southern blotting ili Northern blotting, rendgenski filmovi obično se ne stavljaju na najlonske membrane unutar ladica. Umjesto toga, najlonske membrane koje sadrže elektroforetski odvojene nukleinske kiseline (DNA ili RNA) često se prenose na čvrste nosače, poput Whatman papira, nakon čega slijedi pečenje ili UV umrežavanje kako bi se nukleinske kiseline trajno imobilizirale na membranama.

Kad se izvodi autoradiografija, rendgenski filmovi se stavljaju pored ovih najlonskih membrana ili su u bliskom kontaktu s njima, obično zasebno zamotane u plastičnu foliju. Autoradiografija omogućuje detekciju i vizualizaciju radioaktivno obilježenih nukleinskih kiselina na membranama postavljanjem rendgenskih filmova pored njih u kasete (zatvoreni nosači otporni na svjetlo koji drže film blizu membrane).

Kada se radioaktivni materijal raspadne, on oslobađa energiju u obliku fotona ili elektrona, koji stupaju u interakciju s kristalima srebrnog halida na rendgenskom filmu. To dovodi do razvoja tamnih mrlja ili traka na rendgenskom filmu nakon obrade, koje odgovaraju položajima radioaktivno obilježenih nukleinskih kiselina na membrani.

Stoga se rendgenski film ne postavlja izravno na vrh najlonske membrane, već se koristi odvojeno za hvatanje zračenja koje emitiraju radioaktivne sonde hibridizirane s nukleinskim kiselinama na membrani.