Svrha Protein izraz analiza
Istraživanje proteina jevažan postupak u biologiji , provedena u oba dijagnostičkih i istraživačkih laboratorija u akademskoj zajednici te u industriji . Dijagnostički analiza ekspresije proteina se koristi za otkrivanje prisutnosti bolesti nenormalnim fiziološkim uvjetima . U istraživanju se koristi u proizvodnji bio- inženjeringom proteina za daljnje znanstvene studije ili u razvoju lijekova . Ekspresija proteina
ekspresija proteina je vrlo jednostavno proizvodnja proteina iz određenog aminokiselinskog slijeda , koji je sa svoje strane određuje definirana sekvenca gena . Razumijevanje ovih sekvenci omogućujeistraživaču da modificiranje proteina u različitim način - na primjer , stavljanjem fluorescentne oznake na protein , tako da se može otkriti , ili uklanjanjem dio proteina koji može interferirati s proizvodnjom ili obrada pomoću stanice .
metodama i alatima za analizu ekspresija proteina
Protein izraz analiziran pomoću vrlo sofisticirane i specijaliziranih tehnologija i postupaka , kao što su ELISA , Imunoanalize , masenu spektrometriju , i slike . U većini slučajevaneposredno protein detektira - na primjer , pomoću antitijela koje se veže na njega , a zatim pomoću sekundarnog sustava detekcije to vizualizirati . Osnovna tehnika detekcije proteina je da je Western blot , tijekom kojegse pokreće putem protein agaroznom gelu i zatim preneseni na membranu . Nakon toga je " obilježeni " , omogućujućivezanje protutijela na njega , i antitijelo se zatim reagira s kemijskim otopinom , kao što je srebro bojom , da se dobije sliku položaja proteinskog na mrlje . To daje indikaciju o veličini proteina i da li je prisutan ili kao višestruke pojedinačne jedinice . Drugi se obično koristi metoda je fluorescentno otkrivanje . Vezivanja antitijela označene s fluorescentnim čestica na proteine će joj omogućiti da se vizualizirati mikroskopije .
Svrha Analizirajući ekspresija proteina
Studiranje izraz proteina daje istražitelj naznaku gdje se proizvodi ( odnosno , njegov izraz uzorak i lokalizacija ) ili njegove količine ( tj. njegova tkiva ili stanične razine ) . Ova informacija se koristi u dijagnostičkim patologije u , na primjer ,otkrivanje urinarne proteina kako bi se utvrdilo da lije pacijent bubrežnih bolesti , kao što je renalna tubularna bolesti ili dijabetička nefropatija . U genetskih laboratorija gen eksperimentima kloniranja obično rekombinantni ( genetski promijenjene ) proteine . Analiza tih sintetičkih molekula ključna u provjeru genske sekvence ili provjere mutacija koja može i ne mora biti poželjna . Na primjer , cjepiva su proteini koje proizvode umjetno modificiranih jedinica gena . Ovi proteini moraju se analizirati pažljivo kako bi se osiguralo da su geni izmijenjeni u ispravnom i željeni način , kako bi izbjegli neželjene stranu ili toksične učinke .
Protein Expression Analysis zapadne blottingu
analiza ekspresije proteina pomoću western blot-a je vrlo rutinski izvodi laboratorijski postupak, kako bi se ocijenila znanstvenici kloniranje gena i rekombinantnu produkciju proteina . Na primjer , u molekularnoj biologiji i genetskog inženjerstva , geni iz različitih vrsta ( kao što su miš i čovjeka ) su spojeni i stavljeni u bakterijsku stanicu, a koji je sposoban za ekspresiju proteina . Kako bi se osiguralo da se točno protein se generira , njegova ekspresija se mora biti analiziran pomoću Western blota . Western bojenje također koristi u medicinske patologije dijagnosticirati kravlje bolesti i HIV-a .
Ekspresija proteina analiza protočnom citometrijom
Protočna citometrija zahtijeva stanice da se obojenog fluorescentno antitijelo koje se veže na protein izražen na površini ili unutar stanice , . To se koristi u farmaceutskoj istraživanja pronaći molekule ( citokini) koje su jedinstvene za određeni skup stanica i koji su uključeni u staničnoj signalizaciji i komunikacije . To je važno, tako da jeučinak lijekova na normalne stanične fiziologije i funkcije može se pratiti tijekom razvoja lijekova i kliničkih ispitivanja .
