Protokol za DAPI Stain

DAPI predstavlja kemijsku 4' - 6 -diamidino - 2 - fenilindola , a koristi se za bojenje dvolančanu DNA . Spoj tvori plave fluorescentne komplekse s jezgrama stanica i tako se obično koristi za označavanje strukturu stanica . Vrsta i gustoća bojenja može identificirati mrtve ili umiranje stanica . Priprema DAPI Rješenje

DAPI rješenje prvo mora biti razrijeđen u radno rješenje . Na primjer , 10 mg Invitrogen DAPI proizvod mora biti pomiješana s 2 ml deionizirane vode , a zatim je razrijeđena na 300 nano - molarna koncentracija ( smjera će biti prisutna u proizvodu ) s fosfatnim puferom u fiziološkoj otopini ( PBS ) .

Priprema uzorka

popraviti uzorak kao odgovarajući na vrstu uzorka koji se ispituje na slajd . Dodajte 300 mikrolitara DAPI radnog rješenje na uzorku i izleći od jedne do pet minuta . Isperite slajd s PBS .
Analiziranje

Koristite fluorescentnog mikroskopa gledati na uzorku slide - mounted . U DAPI - obojanih jezgri može se prepoznati po plavoj svjetlosne.