Kako otkloniti poteškoće s tri Fragment podvezivanja

Ligation jemetoda koja se koristi u biološkim istraživanjima za ulazak u zasebne molekule DNA. Proces je pojednostavljen pomoću komercijalno dostupnih ligacije setove . Postupak podvezivanja obično slijedi transformacija , proces umetanje udruženim DNA u bakterijama vektor primatelja , klonirati i pojačati DNK . Zbog složenosti metode , rezultati često ne podudaraju sa željenim proizvodom i zahtijevaju rješavanje problema . To je više prevladava u pokušaju da se pridruže više fragmenata , kao što je u trostrukom podvezivanja . Ono što vam treba
Ligation kit
Ligation Protokol
agaroznom gelu
50 X TBA pufera ( 242 g Tris baze , 57,1 ml ledene octene kiseline , 100 ml 0,5 M EDTA razrijeđen na 1 litru s vodom )
deionizirane vode
DNK kit