Parafin Ugradnja Protokol

Znanstvenici obično trebaju udružiti bioloških uzoraka u poglavlju ih. To ga čini lakšim za znanstvenike dodati boje , antitijela i probe na biološkom uzorku . Također se smanjuje i sloj različitih slojeva stanica . Znanstvenici koristiti parafinski vosak kao hard matrice za rezanje , jer parafin ne miješati s vodom . Parafin je vrsta ugljikovodika . Biološki uzorci sadrže vodu , pa znanstvenici moraju dehidrira uzorke pomoću sve više koncentrirani etanola kupke . Ksilen

Znanstvenici uklonili etanol pomoću ksilcn . Onda oni koriste rastopljenog parafinski vosak za uklanjanje ksilcn . Za svjetlosnim mikroskopom , dijelovi parafin su obično debljine pet J.. Parafinsku nije dovoljno teško za tanje kriške . Znanstvenici rehidriranje tkivo pomoću ksilcn prvi , a zatim etanola . Onda su isperite biološkog uzorka s destiliranom vodom kako bi se izbjegla kontaminacija .
Učvršćivanje

parafin -ugrađen tkiva obično fiksne pomoću neutralni puferirani formalin , što jekomercijalna verzija formaldehid . To uključuje paraformaldehidom i metanola , čime se sprečava formaldehid pretvara u mravljoj kiselini . Tanko narezane tkiva potrebno 48 sati fiksacije na sobnoj temperaturi optimalno histologiju , što jeproučavanje mikroskopske anatomije . Inače ,tkivo će očvrsnuti i postati krhki . Prije obrade ,tkivo se obično čuvaju u 70 posto etanola na temperaturi od 4 stupnja Celzijusa .

Parafin Procesori

Znanstvenici često koriste parafin procesore poslati tkiva kroz kupke koje postupno dehidrira materijal prije nego vruće parafina može ući kroz tkiva . Znanstvenici pokrenuti procesor preko noći . Procesor je samo zagrijava tkivo za određenu duljinu vremena ovisno o tkivu bi to ne postane teško i krhki . Procesor koristi vakuum koji ubrzava prolazak parafina i uklanja mjehurića zraka . Nakon obrade tkiva su pohranjeni u kazetama na sobnoj temperaturi .
Vosak topljenja

parafinska topi jedan sat prije dodavanja tkiva . Cijele kasete se stavi u 65 stupnjeva Celzijusa parafina kupelji 15 minuta . Hladni aluminij rashladnog tijela hladi parafinski vosak za 20 minuta . Kada su voštane pukotine ili tkiva nisu pravilno poravnati ,znanstvenik topi parafin i ponavlja postupak .
Rezanje

Kad secira tkivo ,znanstvenik dobiva kadu vodom da se 35 do 37 stupnjeva Celzija . Voda je svježe i deioniziranog . Blokovi su postavljeni licem na ledenoj blok ili topline za 10 minuta . Oštrica reže blok na dijelove . Dva problemi koji se mogu pojaviti su siromašni ribboning i podijelio primjerci . Kadprimjerci fragment ,voda je prevruće . Biloblok ne i vrpcom , trebali biste ga vratiti na led blok, a firma je vosak prije ponovnog pokretanja .