Kako izvesti ELISA test

ELISA ili ELISA testa , je biokemijski laboratorij tehnika radi otkrivanja antigena ( npr. proteina ) ili antitijela u eksperimentalnom uzorku . Test se koristi vezanja protutijela s antigenom može se koristiti i za druge stanice i ispitnom molekularne mehanizma vezivanja i . U osnovi proteina ELISA testu ," uhvatiti " antitijela ili proteina utvrđen je u pokusnoj jelo i dopustio da se pridržavaju jelo , nakon čega" proba" sredstva ( kao što je jedan protein od interesa ), utvrđen je i inkubirana sa sredstvom za hvatanje . Nakon nekoliko pranja ," otkrivanje " antitijelo je dodano da bi se vizualizirali prisutnost ili odsutnost ili protutijelo - antigen protein - protein vezanja . Ono što vam treba
Assay posudu ( npr. 96 ) i bloka
antitijelo za hvatanje ( razrijedi se 5 ug /ml u 50 mM NaHCO2 , pH 9,6)
Probe antitijela /proteina ( razrijeđen na razne koncentracije )
detekciju antitijela ( na primjer , hren peroksidazu vezano antitijelo )
PT pufera ( 1 x PBS , 0,05 posto Tween - 20 )
Blokirajući pufer ( 1 x PBS-u s 5 mg /ml BSA , i 5 posto obrano mlijeko u 1x PBS )
Detection reagensa ( tj. TMB reagens smjesa)
Strojarskom laboratoriju shaker
hladnu prostoriju ili hladnjak
pipeteu i savjeti