Test NBT Protokoli
NBT ili nitro plava tetrazolij jekemijski spoj koji se koristi u području biokemije i imunologije za otkrivanje enzima alkalne fosfataze . Tvar se koristi u dijagnostici test kronične granulomatozna oboljenja , koja utječe na immunodefense stanice . NBT Pokusne protokoli uključuju imunoupijač , BCIP /NBT supstrata alkalne fosfataze rješenje i otkrivanje galaktozidazom i alkalne fosfataze u tkivu . Imunoblotting Srpski Srpski
imunoupijač jetehnika koja se koristi za otkrivanje antitijela , koja su proteini uključeni u proces immunodefense , kaže Susan R. Haynes u " RNA - protein interakcija protokolima . " Ovo uključuje korištenje NBT , kao što je albumin goveđeg seruma , primarnih protutijela 9E10 , Comassie bojivom otopinom , nitrocelulozne membrane , Tris baza puferske otopine , amonijev per- sulfat , natrij dodecil sulfat i zasićene vodene butanol .
BCIP /NBT supstrata alkalne fosfataze rješenje
Tehničko rješenje pripremiti s tri kapi 1 posto 5 - brom - 4 - klor - 3 - indolil -fosfatnog ( BCIP ) , tri kapi 1,5 posto NBT , dvije kapi kemijske tvari levamizol i alkalne fosfataze ( AP ) puferu pri pH 9,5 , prema Svjetskoj IHC web . Otopina je potom inkubira na sobnoj temperaturi i dostupan za korištenje .
Otkrivanje galaktozidne i alkalne fosfataze u tkivu
galaktozidaza su enzimi koji može razbiti galaktozid molekule , prisutne u bakteriji E. coli i drugih organizama . Prema Protokolu Online , tijekom ovog protokola , biolozi koriste uzorke stanica štakora tretiranih s PBS otopinom , glutaraldehida i paraformaldyde . Zatim se pripremiti brom - klor - indolil - galaktopiranozid ili X - gal reakcijskog pufera za uzorke , korištenjem kalijevog ferocijanida , magnezijevog klorida , natrijevog-deoksiholata i deterdženta Nonidet P - 40 . Tehničari mogu koristiti nitro plavu tetrazolium ( NBT ) umjesto kalij ferocijanida kao brži alternativu . Uzorci Cell kasnije se promatrati pod mikroskopom .
