Co - Imunoprecipitacija Protokol
Co - imunotaloženje protokol ( Co - IP ) jenaširoko koristi postupak za analizu interakcija proteina . Postupak općenito se sastoji od tri koraka . Antitijelo je uvedena u staničnom lizatu ,kompleks protutijelo - protein kemijski vezan i protein identificiran putem analize . Co - Imunoprecipitacija Profila
Co - IP se sastoji od niza koraka kako bi osigurali točne rezultate testa . Prvi korak zahtijeva antitijelo specifično na protein koji se dodaje . U drugom koraku , protein - protein ili G -Sepharose se koriste za vezanje na kompleks protutijelo - proteina . Konačno , sekvenciranja očistili proteina bend ili Westernblot analize , koristi se za identifikaciju koprecipitirali proteina .
Opći Koraci
protokol može se podijeliti u tri osnovna koraka u roku od mehanike procesa . Prvi korak je tijek rada za dovršetak postupka u iznosu od najmanje vremena . Drugi korak je opći razlozi za postupak . Završni korak je rješavanje problema .
Konkretne korake
rad toka počinje s priprema za kulturu upijajući analize i završava s određivanjem prisutnosti bilo proteini . Opća razmatranja sastoji od ključnih koraka , kao što je prije čišćenja , izbor pufera i odabira protein A ili protein G smole. Rješavanje problema bavi pitanjima kao što nema otkrivanja bjelančevina , vezanje antitijela na bjelančevine , fragmenti antitijela i mogućnost neuspješnog Co- IP .